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荧光分光光度计如何来测定维生素B2的含量?
时间:2017-07-19 点击次数:906
 一、仪器和试剂   
(1)仪器 荧光光度计、四面通石英比色皿一个:1cm 、1和2 mL刻度移液管各一支、吸耳球、洗瓶、镜头纸。   
(2)试剂 10.0μg/ml维生素B2标准溶液、二次蒸馏水 
二、实验步骤   
(1). 打开氙灯,再打开主机,然后打开计算机启动工作站并初始化仪器,预热30min  
(2) 仪器初始化完毕后,在工作界面上选择测量项目,设置适当的仪器参数:设置发射波长为540 nm,在200~500范围内扫描,纪录荧光发射强度和激发波长的关系曲线,便得到激发光谱。从激发光谱图上可以找出其zui大激发波长为440nm   
(3)标准溶液及样品的荧光测定      
将激发波长固定在440nm,荧光发射波长为540nm。测量上述系列标准维生素Bz溶液的荧光发射强度。以溶液的荧光发射强度为纵坐标,标准溶液浓度为横坐标,制作标准曲线。      
在同样条件下测定未知溶液的荧光强度,并由标准曲线确定未知试样中维生素Bz的浓度,计算药片中的维生素Bz的含量。  
(4)退出主程序,关闭计算机,先关主机,zui后关氙灯。

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