这几年对分光光度计的使用越来越广泛，并且还在不断改进，以有关学科为基础，目前的分光光度计功能更加齐全。应用的范围扩展到农工业、食品与卫生等等研究领域，成为目前我国使用多的测试手段。朗伯-- 比尔定律是分析分光光度法的基础，所谓的比尔定律就是溶液的吸光度与溶液的浓度还有液层相乘所得出来的数字呈现正比例变化规律，分光光度计分为好多种分度计，它们根据波长的长短进行分级。例如紫外光分度计、可见光分度计、红外光分度计等等。上面所提到的分光光度计基本上都是以光源、单色器、狭缝等等检测器系统构成的。分光光度计当中重要的指标是波长重复性、光度准确性、光度重复性，同时这几个指标也能够判断仪器是否正常。

    1 波长准确度及其检测方法

 所谓的波长准确度就是，使用某一种测量仪器对一段波长的物质谱线进行测量，波长理论值与测量出来的值的差称之为波长准确度。其能够有效影响测量正确结果。一般来说，分光光度法测量是在一段的波长之下进行的，被测量的对象在这个地方的吸光程度能够体现出测量的结果。波长误差是真实值与测量值之差，系统误差与随机误差都属于波长误差。波长准确度就是波长的系统误差，在比较各种仪器所测量的结果来分析，值得关注的就是波长准确度。装置仪器再进制造时仪器没有处于准备状态而造成的误差叫波长系统误差，这种误差也称之为机构误差。只不过系统误差能够有被消除的可能，另外一个则不行。

• 辐射光源法  使用一些有特点的发射谱线的元素等，用其所产生特定的谱线来检查仪器，这些特定的元素灯包括汞灯。氘灯、钠灯等等。因为他们发射的是线状光谱，这种光谱有特点并且其准确度很高，所以是目前被应用广泛的一种。第二个氘灯能够被用于仪器紫外区的光源，因为氘灯在紫外区具备一定的连续光谱。其实他们这两种等在可见区有两条分离的，强度高的特征谱线。这种特征谱线能够测量仪器的波长准确度。因为现在的仪器越来越自动化，所以氘灯经常用仪器初始化波长自动定位的标准。汞灯更加便于安装与携带，所以现在汞灯是普遍的检测工具。大致顺序是，首先把汞灯放在仪器光源的地方，灯的透光面与进光口对齐，其次，再选取几条能量强的谱线进行测量，在这几条谱线中选一个大的波长值，多重复几次，再去它们的平均数，这就是后的波长准确度。

• 标准滤光片法  利用多光束干涉原理，在光学基片上镀多层介质，进而制成干涉滤光片。一般情况下，波长的透射峰是干涉滤光片确定的。通过对其中心波长的验测进而确定波长准确度。这就对干涉虑光片提高了要求，其务必要有特定的半峰宽窄与大透射比高。在进行检测时，首先把干涉滤光片垂直在光路内，让其从短波朝着长波进行运动。得出波长测量值，再把这个数字与参考值进行对比，后得出波长准确度。定期送检干涉滤光片是必要的，因为在其中的中心波长会逐渐发生偏移。采用含稀土元素作为材料进行检测干涉滤光片。稀土元素滤光片再

制造时由于方式不同，后导致特征峰波长值出现偏移现象。

(3) 溶液法  因为大部分的稀土元素氧化物溶液有着比较明显的吸收峰，所以可以利用稀土元素来对仪器的波长准确度进行测量。测定紫外可见分光光度计的氧化溶液应用多的是氧化钬溶液。但是，氧化钬溶液在特定的波长范围内有比较多的吸收峰，所以在进行选择是要慎重。

2 波长重复性

进行很多次的波长测试之后，分析测试数据可以发现其有一定的离散性，称之为波长重复性。其概念也是指分析多次测量结果的正确程度。波长精密度跟波长重复性的意思差不多，在测量波长的时候，尽量多测量几次，再取其大值与小值的差被称之为波长重复性。波长准确度与波长重复性二者有一定的联系，前者指的是仪器系统误差，后者是仪器的随机误差。在进行测量时，环境因素还有波长传动机构不精密等等会影响准确度，这就是随机误差。在进行测试时，处于不同的环境下仪器进行测量时，在一个短时间段，对发射谱线的多次测量，并且测量结果基本一致，这就是波长重复性。

3 光度准确度

实际的测光度值与准确值之差被称之为光度准确度。若想对仪器进行正确测量光度准确度，就必须选择液体或者是固体

的标准物质检测仪器的透射比的准确程度。这里所说的透射比准确度意思是，某一个仪器对一个标准的透射比值样品的测量值和理论值之差，称之为透射比准确度。这个准确度并不包括上面所说的随机误差，只是指仪器光度值的系统误差。透射比准确度能够准确反映出仪器的各方面综合性能，其是否准确是使用者关心的问题。

4 光度重复性

光度重复性是指在不考虑系统误差时，在相同的环境下，进行无时效变化试样，频繁的放到样品池中，在一个相对较短的时间段之内，多次测量，后发现的一致性，称之为随机误差。光度重复性是研究与分析结果时，重要的参考对象，也是主要的影响因素，后的值是否准确，与光度重复性有直接关联，是关键性的技术指标。

5 结语

在能够正确理解分光光度计技术指标的基础之上，在结合正确的检测方法，每一个环节都重视起来，只有这样才能够保证后结果的准确性。