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上海奥析科学仪器有限公司紫外分光光度计第三法测qing化物
时间:2016-08-24 点击次数:900

第三法

原理在酸性条件下溴化氰与吡啶联苯胺发生显色反

应,采用紫外-可见分光光度法测定H ib多糖衍生物中溴化

氰的含量。

试剂 1 )6 0%的吡啶溶液量取吡啶30ml,加水

20ml,摇匀,即得。

(2)2%盐酸溶液量取盐酸0.5ml,加水9. 5ml,摇匀,

即得。

(3 )吡啶联苯胺溶液取联苯胺0.5g,精密称定,加

60%吡啶溶液50ml使溶解,再加人2%盐酸溶液10ml,摇

匀,即得。临用前配制。

对照溶液的制备(1)0. 1 m g /m l溴化氰对照贮备液

取溴化氰10mg,精密称定,加乙腈适量使溶解,加水稀释

100ml,摇匀,即得。临用前配制。

(2 )溴化氰对照工作液(500ng/ml) 精密量取溴化氰对

照贮备液lm l,加水稀释至200ml,摇匀,即得。

供试品溶液的制备取多糖衍生物适量,配制成lOmg/ml

的溶液,即得。

测定法量取吡啶联苯胺溶液2. Oml,加水2. Oml,混

匀,2CTC以下、暗处放置1 5分钟后,在波长520mn处测定

吸光度,作为空白对照。

量取供试品溶液2. O m l加吡啶联苯胺溶液2. Oml,

匀,20X:以下、暗处放置1 5分钟后,在波长520nm处测定

吸光度。

分别量取溴化氰对照工作液0.1ml0.2ml0.4ml

0.6ml0.8m l1. Om l于试管中,每管依次加水1.9ml

1.8ml1.6ml1.4ml1.2ml1.0ml,加人P比嗤联苯胺溶

2. Oml,混匀,20°C以下、暗处放置1 5分钟后,在波长

520mn处测定吸光度。

结果计算以对照工作液中溴化氰的含量(ng/ml) 对其

相应的吸光度作线性回归,求得线性回归方程,将供试品溶

液的吸光度代人线性回归方程,求得供试品溶液中溴化氰的

含量 B (n g/m l)

供试品中溴化氰的含量(ng/mg) = |

100

 

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