二氧化钛是家禽消化试验中常用的外源指示剂之一, 试验采用分光光度计法测定了家 禽饲料和食糜中二氧化钛含量。取 0.15 g饲料或 0.1 g冻干食糜样品溶解于 7.4 mol/l 的硫酸溶液中, 然后加入 30%双氧水, 溶液呈现典型的桔黄色。取一部分溶液于 410 nm波长比色, 测定溶液的吸光度 值, 根据标准曲线计算二氧化钛含量。结果表明, 该方法的平均回收率为 97.35%。

指示剂法是测定家禽饲料养分消化率的常用方 法之一。该方法的关键在于选择适宜的指示剂。理想 的指示剂应该具有稳定的化学性质, 不能被动物消 化、吸收和分解, 同时也不与肠道内的微生物相互作 用, 但必须在消化道内随食糜均匀流动, 重要是要 有较高的回收率和检测灵敏度。目前较常用的外源指 示剂有三氧化二铬、二氧化钛和酸不溶灰分。 二氧化钛化学性质稳定, 不溶于水和稀酸, 每天 摄入 2~3 g对动物无害, 并能*排泄到粪中(95%以 上的回收率)。与其它指示剂相比, 二氧化钛具有回收 率变异较小, 不改变日粮颜色, 无致癌性, 可合法添加 (AAFCO,1996), 检测灵敏度高, 在饲料中的添加量低 (一般为 0.2%~0.5%)等特点, 因而是一种较为理想的 外源指示剂。

本试验旨在建立分光光度法测定家禽饲料和食 糜中二氧化钛含量的方法, 便于今后采用二氧化钛指 示剂法准确测定饲料的养分消化率。
1 材料与方法

1.1 测定原理 TiO2 在热的浓硫酸中溶解生成硫酸钛酰, 硫酸钛 酰与 H2O2 可生成较稳定的呈桔黄色的[TiO(H2O2)]2+, 在一定浓度范围内其在 410 nm 波长下的吸光度与 TiO2 含量呈线性关系。
TiO2+H2SO4=TiOSO4+H2O TiO2++H2O2=[TiO(H2O2)]2+(桔黄色)

1.2 仪器 分光光度计(备有 1 cm比色皿); 分析天平(感量 0.000 1 g); 电炉; 容量瓶(100、 1 000 ml); 刻度移液管 (1、 2、 5、 10、 20 ml);烧杯(100、 200 ml);试剂瓶(1 000 ml)。

 1.3 试剂 硫酸、 30%过氧化氢溶液、二氧化钛, 以上均为分 析纯。 1.3.1 钛标准溶液(0.5 mg/ml) 准确称量 250 mg(至 0.000 1 g)二氧化钛于 烧杯中, 烧杯中加入 100 ml 浓硫酸, 加热至接近沸 腾。烧杯中内容物转移至 500 ml 容量瓶中, 用少许蒸 馏水冲洗烧杯。容量瓶中再缓缓加入 100 ml 浓硫酸, 用蒸馏水稀释并定容至 500 ml。 1.3.2 7.4 mol/l 硫酸溶液 400 ml 浓硫酸缓慢注入盛有约 400 ml 蒸馏水的 1 000 ml 烧杯中, 并且用玻璃棒不断搅拌, 待溶液冷 却后, 转移至 1 000 ml 容量瓶中, 用蒸馏水定容。

1.4 标准曲线绘制 用刻度移液管取钛标准溶液(0.5 mg/ml)0、 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9、 10 ml,分别注入 11 只 100 ml 容量瓶中。 在上述容量瓶中, 依次加入 7.4 mol/l 硫酸溶液 10、 9、 8、 7、 6、 5、 4、 3、 2、 1、 0 ml, 摇匀后, 用移液管各加入 20 ml 过氧化氢溶液(30%),后用蒸馏水定容至 100ml 作为样品的标准液。用不含钛的样品作空白调零。 在分光光度计上, 以 410 nm为工作波长, 比色测 定各瓶中样品标准溶液的吸光度。吸光度和钛浓度呈 线性关系的大浓度为 0.05 mg/ml。根据测定吸光度 及钛浓度绘制标准曲线。

 1.5 试验步骤量约 0.1 g 冻干食糜样品或 0.15 g 饲料样品 (做平行)于瓷坩锅中, 至电炉上小心炭化至无烟后, 于 茂福炉 580 ℃灼烧 13 h。冷却后, 加入 7.4 mol/l 硫酸 溶液 10 ml。瓷坩锅置于电炉上加热, 样品缓慢沸腾, 直至*溶解。冷却后,坩锅内内容物用 25 ml 蒸馏水 冲洗, 转移至 100 ml 容量瓶中。容量瓶中加入 20 ml H2O2(30%), 蒸馏水定容至 100 ml。定性滤纸过滤, 取 部分溶液在 410 nm处比色。 1.6 计算公式 a(%)=10b/m× 100 式中:a—— —样品中 TiO2 含量(%); b—— —在标准曲线上查得样品溶液中钛浓度 (mg/ml); m—— —样品质量(g)。
2 结果
2.1 钛浓度测定的标准曲线
钛浓度测定的标准曲线见图 1。钛浓度和吸光度 的标准曲线为 y=9.164 7x,R2=0.999 7。2.2 试验结果 测得的家禽饲料和食糜中二氧化钛含量及回收 率见表 1。
由表 1 可以看出, 二氧化钛的回收率范围在 95.12%～ 98.80%之间,平均回收率为(97.35± 1.07)%。TiO2 的 3 个添加量 0.01、 0.02、 0.03 的平均回收率分别为 (98.35± 0.69)%、 (97.31± 0.12)%、 (96.39± 1.07)%。回收率 是判断分析方法准确度的重要标准。通过本次测定的 结果来看, 达到了分析测定的要求, 表明用分光光度 计法可以准确测定家禽饲料和食糜中二氧化钛含量。 总之, 该方法制样过程简单, 试验过程易于操作 和控制; 准确性高、重复性好。是一种可靠的家禽饲料 和食糜中二氧化钛定量测定方法