本文介绍了紫外-可见分光光度计透射比准确度在不同的吸光度测量范围对测量结果的影响, 从而在仪器的使 用上应选择在合适的吸光度范围内。

紫外-可见分光光度计是一种现代化的集光、 机、电、计算机为一体的分析仪器,它广泛应用于有机 化学、生物化学 、药品分析、食品检验、医疗卫生、环境 保护、生命科学等领域;它将对研究人类的生存, 发展 和生态平衡提供有力的保障。如何正确理解紫外 - 可见分光光度计的各项关键指标并正确使用,对我们 的分析有着重要意义 。在工作中经常遇到不同的单 位或同一单位用两台经过计量检定合格的紫外-可 见分光光度计对同一被测样品进行测量,经过比较测 量结果偏差较大,从而无法定论。实际上他们没有注 意到不同的仪器在吸光度不同的使用范围 ,仪器的透 射比(吸光度)准确度对测量结果的影响是不一样的。 下面试述两台经过计量检定合格的紫外-可见分光 光度计透射比准确度对测量结果的影响。 *, 紫外 -可见分光光度计是根据物质 的分子对紫外、可见区辐射(光)产生的吸收光谱和 的朗伯-比耳定律测量物质的性质和含量的分 析仪器。它可以用下面的数学公式描述 : A =-lo gτ=εbC 式中 , A 为吸光度;τ为透射比 ;ε为摩尔吸光系 数;b 为液层厚度;C 为浓度。 朗伯-比耳定律是光度分析中定量分析的基 础、根本的依据 。从理论上说,朗伯 -比耳定律只 适用于单色光,均匀、相互独立的无相互作用的吸收 粒子体系,因此非单色光 ,化学因素, 杂散光, 及测定 时的温度 ,压力、光学传感器的非线性、电子学的噪 声、仪器的光谱带宽等都可引起朗伯 -比耳定律的偏 离。在实际工作中,除了要注意测试波长和参比溶液 的选择外,若被测样品的吸光度太大(浓度太高)或太 小(浓度太稀),都可能产生朗伯-比耳定律的偏离。 如按照 JJG375 -1996《单光束紫外 -可见分光 光度计》和 JJG682 -1990《双光束紫外 -可见分光 光度计计》计量检定规程要求,目前我国评价高精度 紫外-可见分光光度计仪器的透射比准确度在 ±0 . 5 %τ范围内, 则该仪器合格。

表 1 列出了一台仪器 的透射比准确度为 +0 .5 %τ, 一台仪器的透射比准 确度为 -0 .5 %τ的两台仪器在 2 %-98 %的透射比 范围内测量结果之间的比较通过上面数据可以看出, 当一台仪器透射比准 确度为正误差极限, 和另一台仪器透射比准确度为 负误差极限 ,并且透射比大于 80 %τ(吸光度小于 0 . 071A),或小于 10 %τ(吸光度大于 1 .301A)时, 两台 仪器测量结果的相对误差较大, 因此一般的紫外 - 可见分光光度计不适合高浓度和极低浓度的分析, 因此应该通过改变待测样品的浓度或改变吸收池厚 度 ,是被测样品的吸光度处在适当的范围内,才能使 两者测量数据较为一致性。