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紫外可见分光光度计乙酿基测定法
时间:2016-04-08 点击次数:941

O -乙酿基测定法

试剂 1) 2mol/L盐酸羟胺溶液称取盐酸羟胺

13. 9g,加水溶解并稀释至100ml,冷处保存。

(2) 3.5mol/L氢氧化钠溶液称取氢氧化钠14.0g

3 1 1 8 己二酰肼含量测定法

加水使溶解并稀释至100ml

(3) 4mol/L盐酸溶液量取盐酸33.3ml,加水稀释

100ml的溶液。

(4) 0. 37mol/L三氯化铁-盐酸溶液称取三氯化铁

(FeCl3 • 6 H 20) 10. 0 g ,0. lmol/L盐酸溶液溶解并稀

释至100ml

(5) 碱性羟胺溶液量戚等体积的盐酸羟胺溶液

(2mol/L)与氢氧化钠溶液(3.5mol/L)混合。3 小时内

使用。

对照品溶液的制备精密称取已干燥至恒重的氯化乙

酰胆碱22. 7mg (或溴化乙酰胆碱28. 3 m g ) ,50ml量瓶

中,加O.OOlmol/L醋酸钠溶液(pH4. 5) 溶解并稀释至

刻度,摇匀。

供试品溶液的制备取供试品,用水稀释成O 乙酰

基浓度为0. 5?2. 5 m m o I / L的溶液。

测定法精密量取氯化乙酰胆碱(或溴化乙酰胆碱)

对照品溶液 0. 2ml0.4ml0.6ml0.8ml1.0ml,分别

置试管中,补加水至lml,加新鲜配制的碱性羟胺溶液

2 m l ,摇匀,于室温放置4 分钟,加4mol/L盐酸lml,

p H 值至1.2±0.2,摇匀,加0. 37mol/L三氯化铁-盐酸

溶液lml,摇匀,照紫外-可见分光光度法(通则0401)

在波长5 4 0 n m处测定吸光度。另精密量取上述相应的系

列对照品溶液,自补加水至lml起,除加酸与加碱性

羟胺的次序颠倒外,同法操作,用作对应的空白对照。

精密量取供试品溶液l ml置试管中,自“加新鲜配制

的碱性羟胺溶液2ml起,同法操作;另取供试品溶液

l m i ,与对照品溶液的空白对照同法操作,用作供试品的

空白对照。

将标准管各吸光度分别减去相应的空白对照管的吸光

度,以标准管中所含的对照品溶液的体积对其相应的吸光

度作直线回归,将供试品的吸光度减去相应的空白对照管

的吸光度后代入直线回归方程,计算出每lml供试品相当

于对照品溶液的体积(V ml)

供试品中0乙酰基含量(mmol/L) = V X 2 . 5

式中2. 5 为对照品溶液中乙酰胆碱的含量(mmol/L)

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