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紫外可见分光光度计己二酰肼含量测定法
时间:2016-04-11 点击次数:1603

 

紫外可见分光光度计己二酰肼含量测定法

本法系依据在四硼酸钠存在的条件下,己二酰肼

( A D H ) 中的氨基基团能与三硝基苯磺酸(T N B S ) 发生

显色反应,采用紫外-可见分光光度法测定b 型流感嗜血

杆菌多糖衍生物中己二酰胼的含量。

试剂 1 ) 己二酰肼对照品贮备液(lmg/ml)

密称定己二酰肼0. I00g,加水定容至100ml,于一20DC

保存。

( 2 )己二酰肼对照品工作液(20Mg/ml) 精密量取

A D H 对照品贮备液0.2ml,加水定容至10ml

(3) 5 % 四硼酸钠溶液称取四硼酸钠(Na2B40 7

10H2O) 47.35g,加水定容至500ml,于室温保存。

(4) 3 % T N B S溶液量取T N B S 5ml, 加水定容至

50ml,于一20°C保存。

测定法量取5 % 四硼酸钠溶液1.0ml,加水lml

混匀,再加人3 % T N B S 溶液0.3ml,混匀,于享温放置

15分钟,在波长500mn处测定吸光度,作为空白对照。

先将供试品用水稀释至己二酰肼浓度不高于2CVg/ml

作为供试品溶液,然后取1.0ml,加人5% 四硼酸钠溶

1.0ml,自加人3 % T N B S 溶液0.3ml” 起同法

操作。

分别取己二酰胼对照品工作液0. 2ml0. 4ml

0.6ml0.8ml1.0ml于试管中,每管依次加水0.8ml

0.6ml0.4ml0.2mlO m l ,加人5% 四硼酸钠溶液

1. 0 m l ,加入3 % T N B S溶液0.3ml起同法操作。

结果计算以己二酰肼对照品工作液的浓度对其相应

的吸光度作直线回归,求得直线回归方程,将供试品溶液

的吸光度代人直线回归方程,求出供试品溶液的己二酰肼

含量,根据稀释倍数计算供试品的己二酰肼含量。

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