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紫外可见分光光度计的使用要点
时间:2017-03-27 点击次数:740

                    紫外可见分光光度计的使用要点

 紫外可见分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光线透过测试的样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。测量范围一般包括波长范围为400~800 nm的可见光区和波长范围为200400 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。那么使用分光光度计过程中要注意哪些问题呢?

 

  1.坚持标准溶液现用现配,不使用过期标准液。使用仪器之前,一般要校正仪器,看看空白时透光率是否是100%

  2.比色皿应该保持清洁,干燥。如有污物,可用稀盐酸清洗后,再用11的酒精与乙米清洗凉干。禁止用硬物碰或擦透明表面。或者建议使用10%的盐酸溶液浸泡,然后用无水乙醇冲洗2~3次。比色皿具有方向性,使用时要注意,仔细观察比色皿上方应该有一个箭头标志的,代表入射光方向。注入和倒出溶液时,应该选择非透光面。使用配对的比色皿。

  3.防止仪器振动,影响光学系统。

  4.在开机状态,不测量时,应该打开样品池门,否则,影响光电传感器寿命。

  5.样品集中测量,避免开机次数,可延长光源寿命。

  6.仪器工作稳定性差,漂移大时,应该考虑更换光源或光电元件。

  7.一般分光仪主要有光源部分、光路部分、检测器三的部分,光路有的情况是稳压电源问题,钨灯问题及钨灯位置与光路不一致等问题。光路部分主要有比色皿不干净,灯光与比色皿位置不合适(在正常情况下,比色皿位置放一张白纸,可以清楚看到光斑形状呈显矩形,属于正常情况。对于检测器大多数是正常的,但是光敏管或者光电管有时侯也会出现问题。

  8.若峰出现很多“毛刺”,可能是扫描速度过快,浓度过高或者狭缝过小;

  9.紫外分光光度计用来测紫外光时,石英皿用来调零时不稳定,是由那些原因?首先确定是否用成玻璃比色皿,判断方法在紫外区任一波长下用空气调零测比色皿的吸光度如果超过1ABS则比色皿用错。再次用空气调零看零点是否稳定,如不稳则是仪器问题,如空气稳定而放入石英皿后不稳定,则检查是否空白溶液吸光度太高,是否空白溶液药品过期,或者空白溶液透明范围不适合此波长测量比如甲醇在210NM以下吸光度很大无法调零。

  10.仪器狭缝宽度的选择狭缝的宽度会直接影响到测定的灵敏度和校准曲线的线性范围。狭缝宽度过大时,入射光的单色光降低,校准曲线偏离比耳定律,灵敏度降低;狭缝宽度过窄时,光强变弱,势必要提高仪器的增益,随之而来的是仪器噪声增大,于测量不利。选择狭缝宽度的方法是:测量吸光度随狭缝宽度的变化。狭缝的宽度在一个范围内,吸光度是不变的,当狭缝宽度大到某一程度时,吸光度开始减小。因此,在不减小吸光度时的zui大狭缝宽度,即是所欲选取的合适的狭缝宽度。

  11.紫外测量吸光度值不准

  (1).仪器调零后跳动大的话那可能是仪器有问题。

  (2).调零稳定的话,看样品浓度是否过高,控制在0-1个吸光度之间。

  (3).浓度合适的话,看是否比色皿没擦干净,一般可用蒸馏水冲洗一下,擦干后用镜头纸擦干净。

  (4).检查样品是否稳定,如果零点不变而放上样品变化,那么是样品有变化,检查样品是否有问题。

  12.关于仪器维护:

  (1).仪器工作电源一般为220V,允许10%的电压波动。

  (2).为了延长光源使用寿命,在不使时不要开光源灯。

  (3).单色器是仪器的核心部分,装在密封盒内不能拆开,为防止色散元件受潮发霉,必须经常更换蛋色器盒干燥剂。

  (4).必须正确使用吸收池,保护吸收池光学面。

  (5).光电转换元件不能长时间暴光,应避免强光照射或受潮积尘。

 

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