当前位置:主页 > 新闻中心 > UV1901紫外分光光度计测葡萄糖的方法
UV1901紫外分光光度计测葡萄糖的方法
时间:2017-05-05 点击次数:1035

UV1901紫外分光光度计测葡萄糖的方法

 

测定葡萄糖是临床化学中的重要检测项目,钼类杂多酸是光度分析中的重要显色剂,主要用来测定硅、磷等物质。葡萄糖在适当条件下能有显色反应,其吸光度与葡萄糖浓度呈线性关系.

实验仪器与试剂

 

UV1901紫外分光光度计(上海奥析科学仪器有限公司)

UV1901紫外分光光度计采用滨松无臭氧环保型氘灯,普通长寿命氘灯会有臭氧产生,长期吸入对身体有害,无臭氧长寿命氘灯就可以有效避免。仪器还采用德国欧士朗钨灯,美国派来芝检测器,双光束光学系统,加厚光学底板,更能保证仪器的稳定性。操作界面和操作系统都是简便快捷版的,减少了检测时间的同时,增加准确性.吸光度可以到小数点后四位。可选配多种附件,自动四联池,七联池,恒温装置,透过率固体架,反射率固体架等。

 

UV1901紫外分光光度计的显示方式:6英寸 320×240 点阵带背光数字 LCD

光源灯:预调日本滨松无臭氧环保型氘灯 欧司朗长寿命卤钨灯

光学系统:精密双光束光学系统

接口:RS232C串行通讯口用于接配软件,并行打印口用于接配打印机

光谱扫描功能:主机及软件支持

电源电压:100V240V   50/60±1Hz

仪器尺寸:650×450×220mm

净重:25Kg

特点

UV1901紫外分光光度计的光学系统设计和电路控制系统设计十分严谨,元器件的选用控制严格,具有高标准的准确度、重复性、低噪声和低杂散光指标,线性范围和稳定性指标也十分出色。有1nm2nm带宽两种配置适合不同用户选择,大屏幕LCD显示,具高测量精度和稳定性,是一款高品质的仪器。

UV1901紫外分光光度计使用日本滨松无臭氧环保型氘灯,使用寿命达到2000小时,光输出可保持稳定直至其使用寿命,替换极为方便。

UV1901紫外分光光度计提供2种操作模式:主机测量模式或软件控制测量模式。

内建的SCM技术和定性定量分析软件能实现数据采集与处理、光谱测量、动力学测量、定量分析、DNA测定和光谱扫描等扩展功能。菜单下拉式分析软件易于操作。

UV1901紫外分光光度计具有开放式的样品室,可选配反射样品架、固体样品架、恒温水浴和自动进样器等适合于不同的应用。

单机扫描曲线可以存储9条,工作曲线可以存储9条。联机模式储存数量不限。

主要技术指标  

型号

UV1901

UV1902

测光方式

透过率,吸光度,能量,反射率

光谱带宽

1nm

2nm

波长范围

190nm1100nm

波长准确度

≤±0.3nm

波长重复性

0.1nm

★光度范围

0-999.9%(t),-4A4A0-9999C1-9999F

光度准确度

   ≤±0.3%(t) (0100%t)

≤±0.002A(00.)

≤±0.004A(0.51A)

光度重复性

  0.15%(t) (0-100%t)

0.001A(00.)

0.002A(0.51A)

杂光

0.03%(t220nm NaI360nm NaNO2))

★稳定性

     ≤±0.0004A/h500nm,开机预热30min

噪声

≤±0.0003A

★基线平直度

≤±0.001A1901100nm

≤±0.0008A1901100nm

★导数分辨率

>0.5

扫描速度

          

    

 

分析软件

舒适的操作感受和丰富的分析功能--UVCON系列定性定量数据处理分析软件

 

UVCON系列定性定量数据处理分析软件是为上海奥析科学仪器有限公司的170018001900三个系列仪器的专用分析软件。通过专用通讯电缆将仪器主机的RS232C通讯口与电脑上的串行通讯口或USB口联接,利用软件对主机的运行进行控制,并对主机采集到的数据进行分析、处理或输出,帮助完成从常规质控到环保、生物化学、医学卫生、材料等诸多领域的分析研究。

 

●光谱测量

        

  峰谷检测                             扫描参数设定                   扫描图谱

●动力学测量

动力学测量可测定从1-10小时的透射比或吸光度的时间变化,记录间隔从0.1-60秒,可以观察快速的反应和变化。在数据处理功能中有峰谷检测和导数运算。

磷钼黄(钠盐)溶液:浓度为0.10mol/lPH 1,4)盐酸-邻笨二甲酸氢钾缓冲液:浓度为0.4mol/lPH3.0),使用前将这两种溶液1:1混合,制成即用的磷钼黄混合显色溶液;葡萄糖标准溶液:1.00mol/l。所用试剂均为二级以上,实验用水为二次蒸馏水。

测量方法

于一系列25ml容量瓶中,加入一定量的葡萄糖溶液,加4.0ml磷钼黄混合显色溶液,再加少量蒸馏水,将容量瓶放入沸水浴中加热60min,取出流水冷却,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀。静置片刻后,以试剂为空白,于波长690nm处测定其吸光值。

反应温度与时间

在室温下,磷钼黄与葡萄糖混合,即使放置1-2D,也未见发生反应。

然而,当置于沸水浴中时,反应速度将大大提高,60min后,显色达

zui大。

1

a—葡萄糖4×10-5molL,加入混合显色溶液4.0mL,25mL体积;b—葡萄

2×10-3molL,其它同a

2.1.2 反应酸度的确定 实验表明,磷钼黄与葡

萄糖在pH24之间反应比较适宜,pH值太小,显色不完全,pH值过大,磷钼黄将分解。

2.1.3 

磷钼黄用量选择 实验了一系列不同浓度磷钼黄的用量,对葡萄糖在2.0×10-3molL0.1molL的磷钼黄用量为1.8mL,吸光度已达zui大值。本实验选定为2.0mL

2.1.4 缓冲液及其用量选择 实验了乙酸2乙酸钠,磷酸盐,柠檬酸2NaOHHCl2KHC8H4O4缓冲溶液。结果表明,HCl2KHC8H4O4(pH3.0)缓冲

溶液时,显色比较快。而另外3种缓冲溶液显色速度慢,所以选择了HCl2KHC8H4O4缓冲溶液。其用量为2mL左右时,显色稳定。

2.2 测量吸光度的zui佳波长的选择

通过对显色溶液的波长

扫描实验,波长在690nm附近吸收zui大,选定690nm处为吸光度测定波长。

2.3 共存物质的影响及消除

8×10-5molL的葡萄糖试液,50倍的SO42-,NO3-,Cl-,F-,醋酸根,柠檬酸根,酒石酸

,EDTA不影响测定。而SO32-,S2-,NO22-Fe2-等倍时就严重干扰测定。维生素C严重干扰,但维生素C在室温时,可与磷钼黄完全反应,对于维生素C含量不太高时(等量葡萄糖浓度或以下),能利用反应速度的差异,差减扣除其干扰。

2.4 葡萄糖与磷钼黄反应的量的关系

采用等摩尔法测定了葡萄糖与磷钼黄反应量的比例关系,结果见图2。从图可见,当摩尔比为11,吸光度zui大。从文献[4]报道的钼蓝显色反应机理看,本文研究的显色反应,也可能为氧化还原过程。葡萄糖浓度+磷钼黄浓度=1×10-3molL

2.5 

工作曲线的制作

于一系列25mL的容量瓶中,分别加入1.00molL的葡萄糖0,2,5,10,20,30,50ΛL,再加磷钼黄混合显色溶液4.0mL,添加大约5mL二次蒸馏水,摇匀。沸水浴中加热60min,取出流水冷却,稀释至刻度。1cm比色皿,690nm处测定吸光值A。得到回归方程的实验数据为:y(吸光

)=218197x(molL)+0.0018,相关系数r=0.9988

2.6 葡萄糖注射液样品的测定

A:葡萄糖注射液100mL瓶装,含葡萄糖10g

5.0mL样品,稀释至50mL,摇匀,分析中每份取此溶液200ΛL

B:葡萄糖氯化钠注射液250mL瓶装,含葡萄糖12.5g。取5.0mL样品,稀释至50mL,摇匀,分析中每份取此溶液500ΛL。按分析方法进行操作,得到的结果见表1

扫一扫,加微信

版权所有 © 2019 上海奥析科学仪器有限公司
备案号:沪ICP备13035263号-2 技术支持:化工仪器网 管理登陆 GoogleSitemap