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UV1901紫外可见分光光度计测叶绿素含量的方法
时间:2017-05-05 点击次数:1373

UV1901紫外可见分光光度计测叶绿素含量的方法
紫外可见分光光度计时实验室里zui常用,也是对分析人员来说zui有用的分析工具之一。几乎每个分析实验室都离不开紫外可见分光光度计。其原理是根据物质分子对光的选择性吸收特性所建立起来的一种定性、定量的分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。分光光度计测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的光的吸收程度的测量。物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有不同的分子、原子和不同分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这是分光光度计定性和定量分析的基础。分光光度计分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
UV1901紫外可见分光光度计测叶绿素含量的原理:测定叶绿素提取液在zui大吸收波长下的吸光值,即可用朗伯—比尔定律计算出提取液中各色素的含量。
叶绿素a 和叶绿素b 在645nm 和663nm 处有zui大吸收,且两吸收曲线相交于652nm 处。因此测定 提取液在645nm、663nm、652nm 波长下的吸光值,并根据经验公式可分别计算出叶绿素a、叶绿素b 和总叶绿素的含量。
仪器 
UV1901紫外可见分光光度计(上海奥析科学仪器有限公司)
UV1901紫外可见分光光度计采用滨松无臭氧环保型氘灯,普通长寿命氘灯会有臭氧产生,长期吸入对身体有害,无臭氧长寿命氘灯就可以有效避免。仪器还采用德国欧士朗钨灯,美国派来芝检测器,双光束光学系统,加厚光学底板,更能保证仪器的稳定性。操作界面和操作系统都是简便快捷版的,减少了检测时间的同时,增加准确性.吸光度可以到小数点后四位。可选配多种附件,自动四联池,七联池,恒温装置,透过率固体架,反射率固体架等。

UV1901紫外可见分光光度计的显示方式:6英寸 320×240 点阵带背光数字 LCD 
光源灯:预调日本滨松无臭氧环保型氘灯 欧司朗长寿命卤钨灯 
光学系统:精密双光束光学系统
接口:RS232C串行通讯口用于接配软件,并行打印口用于接配打印机
光谱扫描功能:主机及软件支持
电源电压:100V~240V   50/60±1Hz
仪器尺寸:650×450×220(mm)
净重:25Kg
特点
UV1901紫外可见分光光度计的光学系统设计和电路控制系统设计十分严谨,元器件的选用控制严格,具有高标准的准确度、重复性、低噪声和低杂散光指标,线性范围和稳定性指标也十分出色。有1nm和2nm带宽两种配置适合不同用户选择,大屏幕LCD显示,具高测量精度和稳定性,是一款高品质的仪器。
UV1901紫外可见分光光度计使用日本滨松无臭氧环保型氘灯,使用寿命达到2000小时,光输出可保持稳定直至其使用寿命,替换极为方便。
UV1901紫外可见分光光度计提供2种操作模式:主机测量模式或软件控制测量模式。
内建的SCM技术和定性定量分析软件能实现数据采集与处理、光谱测量、动力学测量、定量分析、DNA测定和光谱扫描等扩展功能。菜单下拉式分析软件易于操作。
UV1901紫外可见分光光度计具有开放式的样品室,可选配反射样品架、固体样品架、恒温水浴和自动进样器等适合于不同的应用。
单机扫描曲线可以存储9条,工作曲线可以存储9条。联机模式储存数量不限。
主要技术指标   
型号    UV1901型    UV1902型
测光方式    透过率,吸光度,能量,反射率
光谱带宽    1nm    2nm
波长范围    190nm~1100nm
波长准确度    ≤±0.3nm
波长重复性    ≤0.1nm
★光度范围    0-999.9%(?),-4A~4A,0-9999C,1-9999F
光度准确度       ≤±0.3%(?) (0~100%?)
≤±0.002A(0~0.)
≤±0.004A(0.5~1A)
光度重复性      ≤0.15%(?) (0-100%?)
≤0.001A(0~0.)
≤0.002A(0.5~1A)
杂光    ≤0.03%(?) (220nm NaI,360nm NaNO2))
★稳定性         ≤±0.0004A/h(500nm,开机预热30min)
噪声    ≤±0.0003A
★基线平直度    ≤±0.001A(190~1100nm)    ≤±0.0008A(190~1100nm)
★导数分辨率    >0.5
扫描速度    快      中     慢

分析软件
舒适的操作感受和丰富的分析功能--UVCON系列定性定量数据处理分析软件

UVCON系列定性定量数据处理分析软件是为上海奥析科学仪器有限公司的1700、1800和1900三个系列仪器的专用分析软件。通过专用通讯电缆将仪器主机的RS232C通讯口与电脑上的串行通讯口或USB口联接,利用软件对主机的运行进行控制,并对主机采集到的数据进行分析、处理或输出,帮助完成从常规质控到环保、生物化学、医学卫生、材料等诸多领域的分析研究。

动力学测量可测定从1秒-10小时的透射比或吸光度的时间变化,记录间隔从0.1-60秒,可以观察快速的反应和变化。在数据处理功能中有峰谷检测和导数运算。

电子顶载天平(感量0.01g)、研钵、棕色容量瓶、小漏斗、定量滤纸、吸水纸、擦境纸、滴管。 原料新鲜(或烘干)的植物叶片 试剂 1. 96%乙醇(或80%丙酮) 2. 石英砂 3. 碳酸钙粉 
四、操作步骤
取新鲜植物叶片(或其它绿色组织)或干材料,擦净组织表面污物,去除中脉剪碎。称取剪碎的新鲜样品2g,放入研钵中,加少量石英砂和碳酸钙粉及3mL95%乙醇,研成均浆,再加乙醇10mL,继续研磨至组织变白。静置3~5min。 
取滤纸1张置于漏斗中,用乙醇湿润,沿玻棒把提取液倒入漏斗,滤液流至100mL 棕色容量瓶中;用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次,zui后连同残渣一起倒入漏斗中。 用滴管吸取乙醇,将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。zui后用乙醇定容至100mL,摇匀。 取叶绿体色素提取液在波长665nm、645nm 和652nm 下测定吸光度,以95%乙醇为空白对照。
五、计算 
按照实验原理中提供的经验公式,分别计算植物材料中叶绿素a、b 和总叶绿素的含量。

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