UV1901PC紫外分光光度计法测定荧光增白剂的荧光强度（二苯乙烯三嗪）

荧光增白剂的主要质量指标荧光强度（或称白度）是一种相对的的纯度指标，它是指试样的活性成分与同一结构的标准样品活性成份的相对比值。荧光强度的测定方法有染色法、紫外法和荧光法等。目前我国生产或使用单位大多采用染色法，这是一种间接的测定方法，即使一系列选定浓度的标样与定量的试样在特定的条件下染至棉纱、棉布或纸张上，然后对比被染物（目测或用白度计测量）而确定试样的荧光强度。

UV1901PC紫外分光光度计法测定二笨乙烯三嗪型荧光增白剂的荧光强度的原理

二笨乙烯三嗪型荧光增白剂的分子可以有顺式和反式两种异构体，而该类荧光增白剂在光照后能反射荧光，是由于处于同一平面的反式异构体中，二笨乙烯共轭体系的π电子云重叠的结果。顺式异构体分子中，由于相邻基团的空间的空间位阻，其分子不得处于同一平面，从而二笨乙烯共轭体系被破坏，故不能反射荧光，因此，二笨乙烯三嗪型荧光增白剂的活性成份就是它的反式异构体。

该化合物的紫外（吸收）光谱在270豪微米和349豪微米呈现明显的吸收，其中349豪微米的吸收处相应于反式二笨乙烯分子的共轭体系，而270豪微米的吸收是苯胺基团的吸收峰，因此，顺式异构体的紫外光谱不呈现349豪微米的吸收，所以，当荧光增白剂的荧光强度降低即反式异构体的含量减少时，其紫外光谱的349毫微米吸收峰强度就要下降。不同强度的试样同一浓度水溶液的紫外光谱，显然，荧光强度越高，349毫微米的吸光度越大。

  将10-60毫克/升试样水溶液的紫外光谱中349毫微米吸光度对浓度作图得一通过原点的直线，符合比尔定律。

以349毫微米的比吸收系数作为定量分析的依据。从试样349毫微米的比吸收系数K与标样在同一波长的比吸收系数K，即可求出试样的荧光强度S。

如果先从K 计算出单位荧光强度的比吸收系数K

则将K与K相比，即可直接读出试样的荧光强度。

实验仪器：

UV1901PC紫外可见分光光度计或UV1902PC紫外分光光度计二选一即可

试剂 荧光增白剂

标样：符合标准HG2-382-66荧光强度130

操作步骤：称取一定量的样品，在容量瓶中配成1000毫升水溶液，再用移液管吸移10毫升该溶液至1000毫升水溶液，再用移液管吸移100毫升容量瓶中，加水至刻度。配得的溶液应避光放置，在5分钟内于349毫微米处测量溶液的吸光度E，然后从浓度C（毫克/升）和吸收池厚度L（厘米），计算出比吸收系数K（升/毫克.厘米），K=E/CL.

  光照时间对测量结果的影响：二笨乙烯三嗪型荧光增白剂的反式异构体，在紫外线照射下，分子中的苯环会发生旋转，易购成顺式结构，荧光增白剂溶液的浓度越稀异构化越易发生。

因此，当荧光增白剂试样的溶液暴露在日光下时，它的荧光强度随着照射时间的增加而下降，

当2条曲线是同一个荧光增白剂溶液在刚配制好以及在一般光线下防置了15分钟后的两个紫外光谱，可见15分钟后，349毫微米的吸光度明显下降了。

不同浓度的荧光增白剂试样溶液在一般光线下放置及避光放置后349毫微米吸光度随时间变化的情况。说明了避光放置时，在20分钟内吸光度几乎不变。在一般光线下放置5分钟后，吸光度即下降2.5-1.3%。试样溶度较高时，变化幅度较小。

温度对测量结果的影响：将同一浓度不同温度的试样溶液进行紫外测量，温度的影响为：温度升高1度，吸光度（349毫微米）递增（0.46±0.06%）

样品重复测定实验：

取样品按操作步骤重复测定6次，从测得的比吸收系数求出样品的荧光强度S

计算其标准偏差及变异系数，结果表明，本方法测定样品重现性，度较好。

结果讨论

光照时间和温度对测量结果的影响较大，实验数据说明，如按操作步骤要求，试样溶液配制好以后避光放置，并在5分钟内进行测量，可消除光照的影响，而试样溶液的浓度稍大一些更好，根据使用紫外分光光度计时所要求的吸光度范围，以25毫克/升左右为宜。在实践中，先测定几个温度的标样比吸收系数K，然后根据试样溶液的温度，选择相近温度的K进行计算。

紫外可见分光光度计法不耗用棉布，直接测量试样溶液，测定一个样品仅需10分钟，而染色法除需要耗用棉布（约0.5米/吨）外，分析一次样品需3-4小时。因此，用紫外分光光度计法测定荧光增白剂的荧光强度，用以分析工业产品，控制生产，确是一个快速、简便的方法，度较高，值得推广。